Medicina / Ciências Médicas e da Saúde

Dissertações de Mestrado

Resumo

Os carcinomas do rim compreendem um grupo heterogéneo de tumores que representam cerca de 3% das neoplasias em adultos nos países ocidentais. Destes, cerca de 70-80% são carcinomas renais de células claras. Segundo a classificação de Heidelberg, caracterizam-se por perda de material genético de 3p, incluindo a região 3p25-26 onde está localizado, entre outros, o gene Von Hippel-Lindau (VHL). As mutações do gene supressor tumoral VHL são exclusivas deste tipo de tumores. Adicionalmente, a duplicação da região cromossómica 5q22qter, em especial 5q31-33, é também uma alteração citogenética frequentemente detectada neste tipo histológico. Genes relacionados com o crescimento ou proliferação celular encontram-se localizados nesta região, entre eles o gene colony-stimulating factor 1 receptor (CSF1R), que codifica o receptor da citocina CSF1, a qual controla a produção, diferenciação e função macrofágica. Existem mutações neste gene em doenças hematológicas malignas e a sua sobre-expressão está associada com mau prognóstico em diversas neoplasias, nomeadamente nos cancros da mama e ovário. Recentemente, alguns estudos verificaram que o gene CSF1R é expresso em tumores das células renais, mas o seu papel na carcinogénese renal não está esclarecido. Constituíram objectivos deste trabalho avaliar a expressão do gene CSF1R nos diferentes subtipos histológicos numa série consecutiva de tumores renais e respectivos tecidos normais, analisar por hibridação fluorescente in situ (FISH) a relação entre o número de cópias e a expressão do CSF1R nos carcinomas de células renais mais comuns (células claras, papilares e cromófobos) e pesquisar mutações nos exões 7 e 22 do gene CSF1R em carcinomas de células claras do rim. Nos carcinomas renais de células claras, os resultados por RT-PCR quantitativo demonstram sobre-expressão do transcrito do gene CSF1R, que se traduz em sobreexpressão proteica detectada por imunohistoquímica em todos os tumores deste subtipo histológico. A imunorreactividade dos carcinomas do subtipo de células claras distinguese da observada nos restantes tumores, o que sugere a utilidade da proteína CSF1R como marcador imunohistoquímico no diagnóstico diferencial. A análise do número de cópias do gene CSF1R por FISH revelou alterações numéricas no cromossoma 5 e ganhos relativos do número de cópias do gene CSF1R em relação ao controlo, que podem contribuir para, mas não explicam completamente, a sobre-expressão deste gene nos carcinomas renais das células claras. Por último, identificou-se um polimorfismo e duas mutações germinativas não descritas até à data em doentes com carcinomas renais de células claras. Os resultados aqui apresentados permitem concluir que o gene CSF1Rdesempenha um papel relevante na carcinogénese dos carcinomas renais de células claras.

 

Índice

ABREVIATURAS E SÍMBOLOS
SUMÁRIO
SUMMARY
INTRODUÇÃO

1 – Epidemiologia do cancro do rim

1.1 – Incidência e mortalidade
1.2 – Factores de risco

1.2.1 – Factores ambientais

1.2.2 – História familiar

2 – Características clínico-patológicas

2.1 – Classificação de Heidelberg

2.2 – Estadiamento e prognóstico

3 – Biologia molecular do CCR

4 – Tratamento

4.1 – Cirurgia

4.2 – Radioterapia

4.3 – Terapia biológica

4.3.1 – Terapia dirigida com malato de sunitinib (SUTENT®)

5 – O gene CSF1R

OBJECTIVOS

MÉTODOS

ÍNDICE

1 – Material biológico

2 – Métodos

2.1 – Extracção de ácidos nucleicos
2.2 – RT-PCR Quantitativo
2.3 – Hibridação fluorescente in situ (FISH)
2.4 – Imunohistoquímica
2.5 – Pesquisa de mutações no gene CSF1R

2.5.1 – Reacção em cadeia da polimerase (PCR)

2.5.2 – Sequenciação automática

2.6 – Análise estatística

RESULTADOS

1 – Expressão do gene CSF1R por RT-PCR quantitativo
2 – Número de cópias do gene CSF1R por FISH
3 – Expressão proteica do CSF1R por imunohistoquímica

4 – Pesquisa de mutações no gene CSF1R

DISCUSSÃO

1 – Expressão do gene CSF1R em tumores das células renais
2 – Relação entre o número de cópias e a expressão do gene CSF1R
3 – Mutações no gene CSF1R 

CONCLUSÃO
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 

 

Trabalho completo